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+支原體熒光定量PCR法(qPCR):是在常規PCR基礎上,將『針對支原體特異性保守序列的探針』做熒光標記,使PCR擴增后的產物帶有熒光,利用熒光信號的變化和配套軟件,進行DNA擴增反應的實時監測,簡稱qPCR。
用于聚合酶鏈反應和熒光定量聚合酶鏈反應方法對支原體物種的特異性檢查,每種支原體脫氧核糖核酸經測序驗證,濃度經滴度測定。這些制劑含有從相應的低培養傳代的微生物中,提取的基因組DNA。通過后續的標準化方法分析起始材料(柱吸收方法提?。?,以確定脫氧核糖核酸的完整性和數量。然后對脫氧核糖核酸提取物進行部分測序以確認種屬并進行滴定測量。 基因組DNA提取是分析新測定方法特異性的必要條件。
德國Minerva-Biolabs公司國內總代理威正翔禹生物/締一生物,代理Minerva-Biolabs支原體檢測系列產品,MB支原體祛除類產品,MB產品DNA祛除類等微生物試劑盒。常規PCR檢測德國MB Taq聚合酶1 Unit/µl 濃度,MB Taq DNA聚合酶是一種高效的5‘→3’聚合酶,沒有3‘→5’外切核酸酶活性。在72℃和大約pH9的條件下,MB Taq DNA聚合酶達到它水平的
定量標準品DNA包括支原體基因組DNA和細菌基因組DNA,用于梯度稀釋后,qPCR標準曲線的繪制。支原體PCR絕對定量標準品
歐洲藥典和日本藥典要求,如果用PCR法替代培養法檢測支原體時,此PCR檢測的靈敏度需達到10CFU/ml。如替代DNA染色法,其靈敏度需達到100CFU/ml。100CFU支原體靈敏度標準品