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細胞復蘇的秘密武qi!

更新時間:2022-06-09  |  點擊率:590

細胞培養是指細胞在體外的培養技術,即在無菌條件下,從機體中取出組織或細胞,模擬機體內正常生理狀態下生存的基本條件,讓它在培養皿中繼續生存、生長和繁殖的方法。通過細胞培養我們可以獲得大量的、性狀相同的細胞,以便于研究細胞的形態結構、化學組成及功能和機制。

細胞真的很脆弱,就像小嬰兒一樣,需要你無微不至的關懷。

細胞培養的開始,就是復蘇細胞。如何有條不紊地讓細胞從沉睡中蘇醒?今天就來給大家總結幾個實用小技巧,快點來get!


細胞復蘇流程:


1、將凍存的細胞從液氮罐中取出,立即放入37°C的水浴中進行融化,輕柔晃動,加速融化,直到小瓶中只剩下一小塊冰,時長應控制在1min中;


2、用70%乙醇擦拭瓶外后轉移無菌操作臺中,打開瓶蓋前,用酒精燈火焰對瓶口進行消毒;


3、將預加熱的新鮮*培養基滴入小瓶中。緩慢用移液槍吸取瓶中液體至15ml離心管中,加入適量濃度和體積的*培養基,輕柔混合均勻;


4、200 × g左右細胞懸浮液離心5-10分鐘。實際的離心速度和持續時間因細胞類型而異。棄掉上清,加入新鮮*培養基重懸細胞,并將其轉移到適當的培養容器和推薦的培養環境中。


細胞解凍流程圖


注意事項:


1、液氮溫度低,小心低溫對人造成的傷害,在液相中儲存的冷凍瓶在解凍時存在爆炸的風險,因此,取出凍存管的時候,要做好個人防護。


2、通常細胞集中儲藏在液氮中,取出時應迅速,避免溫差對其他凍存細胞造成影響。


3、復蘇細胞的核心技術,簡而言之就是快融,將在37°C水浴中快速解凍冷凍細胞(< 1分鐘。


4、解凍時,凍存管先放入無菌一次性PE手套中,再放入水中融化,避免污染也方便操作。


5、用預熱過的培養基慢慢稀釋解凍的細胞。


6、解凍細胞后,在培養皿中培養時,應盡量維持高密度,以提高細胞存活率。


7、注意無菌操作,避免細胞發生污染。


細胞高效解凍的另一個成功秘訣,就是選擇一款優質血清!


Ausbian進口特級胎牛血清,有以下優點,可以大程度地幫助實驗者提高細胞實驗成功率:


1. 精選內毒素更低批次(≤3EU/ml)。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩定供應品牌。

實驗室有些細胞,需要長期培養、長期凍存,或者經常復蘇、經常培養的,血清會經常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應該選用更低內毒素的血清,以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。

2. 新批次在試用前,提供試用服務,養細胞更放心。

3. 每個批次產量800-2000升,試用滿意的實驗室批號優先鎖定,保證大多數項目兩年不需換批次,細胞試驗數據穩定。

4. 每年按廠家生產順序,會有多批次平行供應,每個實驗室專屬批號管理,保證供貨穩定。

5. 為Ausbian血清用戶免費提供申報支持,具有完整的檢測報告,為各類項目的申報提供支持(同時為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學驗證等方面,提供更多免費延伸性技術幫助)。

6. 針對特殊科研項目,可提供3-5個平行批次,讓試驗人有更多選擇空間。

7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務,為儲存空間不足的實驗室提供可靠的血清倉儲保護,按要求隨時發貨。

8. Ausbian血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,確保血清無反復凍融。

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