每一個實驗新手們剛進實驗室操作細胞,都是緊張興奮又手忙腳亂,就從最基本的養細胞來說,大家剛開始一定覺得理論知識看起來很容易,但是,在實際情況中一般是這樣的——“到底怎么回事,細胞長不好/細胞又死了/又污染了......"
這時,如果有一份靠譜的細胞培養經驗總結,或許可以幫助你少走彎路,今天就為大家分享一下由我們實驗室總結的細胞培養過程中的知識總結,讓你事半功倍。
首先,我們來看看,什么是細胞培養:
細胞培養是指細胞在體外的培養技術,即在無菌條件下,從機體中取出組織或細胞,模擬機體內正常生理狀態下生存的基本條件,讓它在培養皿中繼續生存、生長和繁殖的方法。通過細胞培養我們可以獲得大量的、性狀相同的細胞,以便于研究細胞的形態結構、化學組成及功能和機制。
細胞真的很脆弱,就像小嬰兒一樣,需要你無微不至的關懷。
培養細胞之前,你需要做好這些準備:
1、耗材的處理、
玻璃器皿的清洗,對于玻璃器皿(細胞瓶、裝營養液的瓶子、小青霉素瓶等)要用洗衣粉刷干凈(注意死角),然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上,之后用清水沖洗數遍,除去殘留酸液。瓶子之類,沖洗過程要使勁搖晃。
2、試劑的配置
試劑配置,細胞培養用的液體一般使用雙蒸以上的水即可。并注意 pH 值的調節。
3、無菌檢驗
無菌檢驗,主要采用過濾除菌:如胰酶、抗生素、G-418 溶液、各類培養基、丙酮酸鈉、谷氨酰胺等。有些可以采用高壓滅菌:如 PBS、D-Hank's等。
不同細胞對培養基的要求是不同的,要根據自己的細胞要求使用。
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