細菌真菌污染還有跡可循,起碼顯微鏡下能夠清晰地看到,但是支原體個子小,不易觀察,由于繁殖速度比較慢,期感染幾乎沒有癥狀。經常稍不留意,就中了支原體的「陰招」。統計顯示,全球大約有60%左右的細胞培養存在或曾經存在過支原體污染。
癥狀1:細胞生長緩慢甚至死亡?
被廣泛使用的細胞培養基,不僅給細胞提供支持和養分,對于支原體而言,也是天堂一般的存在。
與細胞培養高度重合的培養條件,注定了支原體要與細胞共同競爭有限的生存資源。
早有研究表明[1],一些支原體(包括為常見的人型支原體、發酵支原體、精氨酸支原體等),通過精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來供能。當這些支原體混入細胞培養體系后,會與細胞爭精氨酸,導致細胞「吃不飽飯」,出現營養不良的癥狀:生長速率異常、活力下降、易脫壁等等。
而精氨酸又是細胞組蛋白的重要組成成分,缺乏精氨酸會嚴重影響組蛋白合成,引起染色體斷裂。再加上細胞處于長qi饑餓的狀態,終導致細胞生長變慢甚至死亡。
支原體感染癥狀2:細胞變形、碎片增加、易聚團、有小黑點?
經過支原體的這一番操作,細胞結構已經被嚴重破壞,隨之而來的就是細胞形態改變、細胞易聚團、大面積細胞凋亡制造的蛋白碎片(也就是培養基中的碎片和小黑點)
支原體也是如此——當培養體系中感染了支原體并大量繁殖的時候,會向外排放代謝產物,影響體系中的PH,加快培養基變黃的速度。
支原體感染癥狀3:培養基易變黃?
綜上所述,如果你培養的細胞出現以下情況,基本可以確定是支原體感染了,不放心的話可以再配合支原體檢測試劑(檢測神器幫你揪出培養基中的支原體!)進一步確認。
除了影響細胞活力,支原體還會給細胞帶來的幾百種基因表達的改變,包括編碼受體、離子通道、生長因子的基因和癌基因等方面[4]。它包含高度富含免疫原性的脂蛋白,可以錨定在胞膜的外表面,被TLR2等免疫細胞的受體識別。激活NF-kB途徑,進一步導致細胞活化[5],偏離終的實驗結果。
細胞培養小課堂到這里就結束了,希望可以幫你解決實驗上的一些疑惑!